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當(dāng)前位置:首頁新聞中心單克隆抗體與同聚體抗原的雙價(jià)結(jié)合增加親合性

單克隆抗體與同聚體抗原的雙價(jià)結(jié)合增加親合性

更新時(shí)間:2012-02-10點(diǎn)擊次數(shù):4006

親合性(avidity)是測定抗體和抗原復(fù)合物的整體穩(wěn)定性。抗體—抗原相互作用的整體強(qiáng)度受3個(gè)主要因素控制:抗體對表位的內(nèi)在親和力、抗體和抗原的結(jié)合價(jià)以及參與反應(yīng)成分的立體結(jié)構(gòu)。因?yàn)橛H合性是指整個(gè)反應(yīng),故可從根本上決定所用免疫化學(xué)技術(shù)的成敗。

 
    當(dāng)抗體和抗原形成多價(jià)復(fù)合物時(shí)相互作用的強(qiáng)度顯著增加
    大多數(shù)免疫化學(xué)步驟包括多價(jià)相互作用。所有抗體都是多價(jià)的;IgG和大多數(shù)IgA為2價(jià),IgM為10價(jià)。抗原可以是多價(jià)的,因其含有相同表位的多個(gè)拷貝,例如:各種同聚物,或者因?yàn)榇嬖诳杀徊煌贵w識別的眾多表位。多價(jià)相互作用可以顯著地穩(wěn)定免疫復(fù)合物,致使反應(yīng)實(shí)際上是不可逆的。
    多聚性相互作用甚至可以使低親和力抗體牢固地結(jié)合。由于一些方法很可能是多價(jià)的相互作用,所以低親和力抗體在一種方法中可能性能良好,但不適用于另一種方法。當(dāng)抗體在不同方法中顯示這種差別時(shí),經(jīng)常是由于在多價(jià)結(jié)合中的差異造成的。同樣地,在一種方法中不可測的交叉反應(yīng)可能干擾其他方法分析的結(jié)果。
    預(yù)測多價(jià)的影響通常并不容易,因?yàn)榉磻?yīng)包括分子的幾何狀排列產(chǎn)生的空間壓縮。然而,多價(jià)的影響通過下述的幾個(gè)簡單例子來說明:①單克隆抗體與同聚體抗原的相互作用;②多克隆抗體與有多個(gè)表位的抗原結(jié)合產(chǎn)生大量多聚性復(fù)合物;③多克隆抗體與有多個(gè)表位的抗原結(jié)合形成第二抗體與多聚性結(jié)合的靶位;④抗體和固定在固相載體上的抗原結(jié)合。這些模式雖在某些方面有差別,但是具有上述例子的基本特征。
單克隆抗體與同聚體抗原的雙價(jià)結(jié)合增加親合性
 
    同聚體的抗原存在相同的重復(fù)表位,促進(jìn)雙價(jià)結(jié)合
    當(dāng)單克隆抗體和多聚性抗原結(jié)合時(shí),開始的反應(yīng)是與前面討論的雙分子相互作用相同,抗體通過擴(kuò)散遇到抗原。然而,反應(yīng)的第二步是抗體的游離結(jié)合位點(diǎn)和保留相同抗原分子上的同樣位點(diǎn)相結(jié)合。這個(gè)反應(yīng)是發(fā)生在分子內(nèi)的轉(zhuǎn)換并不依靠擴(kuò)散作用。它僅受到構(gòu)象的限制。這種分子復(fù)合物一旦構(gòu)成,單一的抗體—表位相互作用的解離率與一般雙分子復(fù)合物相似。然而,  由于抗原通過另一些相互作用將仍會與之結(jié)合時(shí),觀察到的解離將十分緩慢,因此形成非常穩(wěn)定的抗體—抗原復(fù)合物。
    這種類型的多聚性相互作用在所有免疫化學(xué)中都可能發(fā)生。
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